- Трис-ацетатный буфер
-
Трис-ацетатный буфер (TAE) — буферный раствор, содержащий трис, ускусную кислоту и ЭДТА (этилендиаминтетрауксусную кислоту).
Используется в молекулярной биологии в основном для гель-электрофореза при разделнии фрагментов нуклеиновых кислот.[1] Имеет меньшую буферную ёмкость, чем TBE, в связи с чем быстрее истощается, однако, линейные двухцепочечный фрагменты ДНК перемещаются в TAE быстрее.
Приготовление 50-кратного TAE буфера[2] Компонент Количество для приготовления 100 мл раствора Трис 24,22 г ЭДТА 1,862 г Уксусная кислота (ледяная) 8,96 мл H2O (деионизированная) 73,3 г Для получениея рабочей концентрации 50-кратный буфер разводят в дистиллированной воде в соотношении 1:50.
Применение
TAE широко используется при проведениея гель-электрофореза (в качесте форезного буфера и компонента агарозного геля) для очистки ДНК, анализа ДНК-продуктов, полученных в результате ПЦР, разделения фрагментов ДНК.[3]
См. также
Примечания
- ↑ Ogden, R.C., and Adams, D.A., (1987) Electrophoresis in agarose and acrylamide gels. Methods Enzymol., 152:, 61-87.
- ↑ Расчёт TAE буфера на molbiol.ru. Архивировано из первоисточника 13 декабря 2012.
- ↑ Sambrook, Fritsch, and Maniatis (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, volume 3, apendices B.11 and B.23 ISBN 0-87969-309-6
Категории:- Буферные растворы
- Методы молекулярной биологии
Wikimedia Foundation. 2010.