Электрофорез ДНК

Электрофорез ДНК
Фотография агарозного геля после ДНК-электрофореза. Левая дорожка — фрагменты ДНК известной длины
Результат электрофоретического разделения продуктов ПЦР-реакции. Агарозный гель окрашен бромистым этидием. Визуализация посредством облучения ультрафиолетом с длиной волны 312нм.

Электрофорез ДНК — это аналитический метод, применяемый для разделения фрагментов ДНК по размеру (длине) и форме (в случае, если ДНК образует вторичные структуры, например шпильки). Силы электрического поля, прикладываемого к образцам, заставляют фрагменты ДНК мигрировать через гель. Сахарофосфатный остов молекул ДНК заряжен отрицательно и поэтому цепи ДНК двигаются от катода, заряженного отрицательно, к положительному аноду. Более длинные молекулы мигрируют медленнее, так как задерживаются в геле, более короткие молекулы двигаются быстрее.

К образцам обычно добавляют низкомолекулярный кислый краситель (например, динитрофенол, бромфеноловый синий), чтобы визуализировать ход электрофореза в процессе. Краситель также необходим для того, чтобы определить, когда стоит остановить процесс.

Электрофорез проводится в камере, заполненной буферным раствором. Чаще всего используются буферы, содержащие ЭДТА, трис и борную кислоту: TAE и TBE. Буфер необходим для повышения ионной силы раствора, в котором будет происходить разделение молекул ДНК под действием приложенного электрического поля.

После разделения (иногда краситель вносят в расплавленную агарозу) фрагменты ДНК разной длины визуализируют при помощи флюоресцентных красителей, специфично взаимодействующих с ДНК, например, агарозные гели обычно красят бромистым этидием, который интеркалирует между азотистыми основаниями дуплекса и флюоресцирует в УФ-лучах.

Определение размеров производят путем сравнения коммерчески доступных фрагментов ДНК (DNA ladder, «линейка»), содержащий линейные фрагменты ДНК известной длины.

Для электрофоретического анализа ДНК обычно используют агарозные (для относительно длинных молекул ДНК) и полиакриламидные (для высокого разрешения коротких молекул ДНК, например, в случае секвенирования) гели.

См. также


Wiki letter w.svg
 Для улучшения этой статьи желательно?:
  • Найти и оформить в виде сносок ссылки на авторитетные источники, подтверждающие написанное.
  • Дополнить статью (статья слишком короткая либо содержит лишь словарное определение).
  • Добавить иллюстрации.

Wikimedia Foundation. 2010.

Игры ⚽ Поможем написать курсовую

Полезное


Смотреть что такое "Электрофорез ДНК" в других словарях:

  • Электрофорез в полиакриламидном геле — (сокр. электрофорез в ПААГ, ПААГ электрофорез; англ. PAGE, Polyacrylamide Gel Electrophoresis)  метод молекулярной биологии и биохимии, используемый для разделения белков и нуклеиновых кислот, основанный на движении заряженных… …   Википедия

  • Электрофорез продуктов ПЦР в денатурирующем градиентном геле — Электрофорез продуктов ПЦР в денатурирующем градиентном геле, * электрафарэз прадуктаў ПЛР у дэнатурыруючым градыентным гелі * denaturing gradient gel electrophoresis of PCR products or DGGE of PCR p. электрофорез нуклеотидов, в основе которого… …   Генетика. Энциклопедический словарь

  • Электрофорез в пааг — Электрофорез в полиакриламидном геле (сокр. электрофорез в ПААГ; англ. PAGE, Polyacrylamide Gel Electrophoresis)  метод молекулярной биологии, используемый исследователями для разделения белков и нуклеиновых кислот. В случае электрофореза белков… …   Википедия

  • электрофорез в градиенте денатурирующего геля — Электрофоретический метод разделения макромолекул с высоким разрешением, используемый для идентификации точковых мутаций в молекуле ДНК, заключается в том, что двухцепочечные молекулы помещают в полиакриламидный гель, содержащий линейный градиент …   Справочник технического переводчика

  • Электрофорез в пульсирующем электрическом поле — * электрафарэз у пульсуючым электрычным полі * pulsed field gel electrophoresis or PFGE метод разделения крупных (до 10 Мб) фрагментов ДНК …   Генетика. Энциклопедический словарь

  • ДНК электрофорез — Фотография агарозного геля после ДНК электрофореза. Результат электрофоретического разделения продуктов ПЦР реакции. Агарозный гель окрашен бромистым этидием. Визуализация посредством облучения ультрафиолетом с длинной волны 312нм. ДНК… …   Википедия

  • ДНК-электрофорез — Фотография агарозного геля после ДНК электрофореза. Результат электрофоретического разделения продуктов ПЦР реакции. Агарозный гель окрашен бромистым этидием. Визуализация посредством облучения ультрафиолетом с длинной волны 312нм. ДНК… …   Википедия

  • Электрофорез нуклеиновых кислот — Фотография агарозного геля после ДНК электрофореза. Результат электрофоретического разделения продуктов ПЦР реакции. Агарозный гель окрашен бромистым этидием. Визуализация посредством облучения ультрафиолетом с длинной волны 312нм. ДНК… …   Википедия

  • ДНК-дактилоскопия — Эту страницу предлагается переименовать в Геномная экспертиза. Пояснение причин и обсуждение  на странице Википедия:К переименованию/27 сентября 2012. Возможно, её текущее название не соответствует нормам современного русского языка… …   Википедия

  • ДНК-маркер — Рис.1 Электрофорез ПЦР продуктов в агарозном геле и окрашенных бромистым этидием, полученных методом IRAP амплификации. Левая дорожка  ДНК известной длины (от 900 до 3000 пар нуклеотидов) …   Википедия


Поделиться ссылкой на выделенное

Прямая ссылка:
… Нажмите правой клавишей мыши и выберите «Копировать ссылку»