Бредфорд метод

Метод Бредфорд — один из колориметрических методов количественного определения белков в растворе. Предложен Мерион Бредфорд в 1976 году (Bradford M.M. (1976) Anal. Biochem. 72: 248-254.).

Принцип

Метод основан на реакции красителя кумасси (coomassie) с аргинином и гидрофобными аминокислотными остатками. Связанная форма имеет голубую окраску с максимумом поглощения при 595 нм. Таким образом увеличение адсорбции раствора при длине волны, равной 595 нм, пропорционально количеству белка в растворе.

Метод дает хорошее значение концентрации белка в пределах от 2 мкг/мл до 120 мкг/мл (в этих границах соблюдается линейная зависимость увеличения адсорбции от концентрации, в целом чувствительность метода зависит от соотношения концентраций определяемого белка и красителя: чем больше красителя, тем чувствительней метод), менее "капризный" по сравнению с методом Лоури.

Другие методы

• Биуретовый метод
• Микробиуретовый метод
• метод Лоури
• спектрофотометрический метод

Литература

• Bradford, M. M. (1976) A Rapid and Sensitive Method for the Quantitation of Microgram Quantities of Protein Utilizing the Principle of Protein-Dye Binding. Anal. Biochem. 72:248-254.

Ссылки

• Ветка форума на molbiol.ru с практическими советами по методу