Краситель Романовского

Краситель Романовского сочетает в своем составе эозинат (химически восстановленный эозин) и метиленовый синий, иногда с продуктами окисления последнего — азуром А и азуром Б.^[1] Краситель Романовского является прототипом ряда других красителей, которые применяют для исследования гистологических препаратов крови и костного мозга больных людей, для обнаружения паразитов крови, таких как малярия, а также при широком круге других патологических состояний.^[2][3] Окрашивание красителем Романовского-Райта удобнее, чем окрашивание гематоксилином и эозином, так как позволяет дифференцировать различные типы лейкоцитов.^[4][5]

История красителя Романовского

Окрашивание по Романовскому является прототипом методик окрашивания по Дженнеру (англ. Louis Jenner, 1866—1904) или Май-Грюнвальду (нем. May-Grünwald), Лейшману (англ. William Boog Leishman, 1865—1926), Райту (англ. James Homer Wright, 1869—1928), Гимзе (нем. Gustav Giemsa, 1867—1948) а также Папенгейму (нем. Artur Pappenheim, 1870—1916) и др., которые применяются для дифференциации клеток в мазках патологического материала. В 1879 году Эрлих для этого использовал смеси кислых и основных красителей. Романовский и Малаховский независимо разработали методику с использованием смеси эозина Y и окисленного метиленового синего (публикации 1890—1891 гг)^[6].

Усовершенствования краски Романовского

По причине того, что водные растворы красителей не были устойчивыми в 1901 году Лейшман и в 1902 году Райт (Wright's stain) предложили применение метанола в качестве фиксатора перед окрашиванием.^[7] В 1904^[8] году Гимза улучшил эту методику путем стандартизации растворов красителя и добавления глицерина для увеличения растворимости и стабильности.

Лейкоциты, окрашенные краской Райта:

лимфоцит‎

базофил‎

эозинофил‎

нейтрофил‎

Краситель Райта

Краситель Райта преимущественно применяют при окрашивании мазков периферической крови и аспиратов костного мозга^[9]. Также краситель Райта применяют в цитогенетике для окрашивания хромосом при диагностике наследственных заболеваний и синдромов. Краситель Райта применяют при дифференциальном подсчете лейкоцитов, так как данный способ окрашивания позволяет легко различать форменные элементы белой крови. Буферный краситель Райта, краситель Райта-Гимзы, буферный краситель Райта-Гимза и другие являются различными модификациями красителя Райта. Модификации могут содержать эозин Y, азур Б, метиленовый синий, некоторые коммерчески доступные препараты включают растворы для облегчения окрашивания.

Принцип окраски

Окисление метиленового синего в водном растворе с использованием нагревания и щелочи давало смесь азура А, азура Б, метилена фиолетового и метиленового синего . Затем добавляется эозин Y для получения “нейтрального” красителя. Осадок затем растворяется в смеси метанола и глицерина для получения хранимого раствора. Последний разводится водой или водяным буфером для получения рабочего раствора при приготовлении образцов патологического материала.

См. также

• Красители
• Окраска по Романовскому-Гимзе
• Окраска гематоксилином и эозином

Примечания

1. ↑ http://en.wikipedia.org/wiki/Romanovsky_ Stain
2. ↑ http://en.wikipedia.org/wiki/ Staining_(biology)
3. ↑ StainsFile reference for dyes and staining techniques
4. ↑ Vital Staining for Protozoa and Related Temporary Mounting Techniques ~ Howey, 2000
5. ↑ Photomicrographs of Histology Stains
6. ↑ Безруков А. В. Окраска по Романовскому: к вопросу о приоритете / К 120-й годовщине открытия эффекта Романовского. – 12 с.
7. ↑ Speaking of Fixation: Part 1 and Part 2 - by M. Halit Umar
8. ↑ Giemsa G (1904). «Eine Vereinfachung und Vervollkommnung meiner Methylenazur-Methylenblau-Eosin-Färbemethode zur Erzielung der Romanowsky-Nochtschen Chromatinfärbung.». Centralbl f Bakt etc 37: 308–311.
9. ↑ http://en.wikipedia.org/wiki/ Wright’s_stain

Ссылки

• сайт посвящён памяти Чеслава Ивановича Хенцинского и Дмитрия Леонидовича Романовского (документы)