Секвенирование по Сэнгеру
- Секвенирование по Сэнгеру
-
Метод Сэнгера — метод секвенирования (определения первичной последовательности нуклеотидов молекулы нуклеиновых кислот) ДНК и РНК. Метод Сэнгера также известен как метод обрыва цепи.
Метод основан на присоединении к однонитчатой секвенируемой молекуле ДНК прямого или обратного секвенирующего праймера и синтезе de novo молекулы нуклеиновой кислоты с применением, например, дидезоксинуклеозидтрифосфатов (ddNTP). При этом синтезируются молекулы разной длины с определённым дидезоксинуклеотидом на конце. После разделения синтезированных молекул ДНК электрофорезом возможно определение первичной последовательности.
В современной интерпретации, метод обрыва цепи позволяет секвенировать за один этап последовательность ДНК длиной около 800-1000 нуклеотидов. Для сравнения, метод пиросеквенирования, разработанный в 1996 году, позволяет за один этап определить последовательность значительно меньшего числа нуклеотидов.
Литература
- Sanger F., Niclein S., Coulson A.R. DNA sequencing with chain-terminating inhibitors // Proc Natl Acad Sci USA. — 1977. — Т. 74. — С. 5463-5467.
- Sanger F., Coulson A.R. A rapid method for determining sequences in DNA by primed syntesis with DNA polymerase // J Mol Biol. — 1975. — Т. 94. — С. 444-448.
Wikimedia Foundation.
2010.
Смотреть что такое "Секвенирование по Сэнгеру" в других словарях:
Секвенирование по Сэнгеру (ферментативный метод) — * секвеніраванне па Сэнгеру (ферментатыўны метад) * Sanger sequencing (enzymatic method) техника секвенирования (см.) однонитчатой ДНК. В основе метода присоединение (отжиг, см.) к однонитчатой ДНК мишени секвенирующего праймера () или обратного… … Генетика. Энциклопедический словарь
Секвенирование — биополимеров (белков и нуклеиновых кислот ДНК и РНК) определение их аминокислотной или нуклеотидной последовательности (от лат. sequentum последовательность). В результате секвенирования получают формальное описание… … Википедия
Секвенирование генома — * секвеніраванне генома * genome sequencing идентификация и порядковая запись всех нуклеотидных пар оснований генома. В н. вр. С. г. проводят современными методами химической деградации ДНК Максама Гилберта () и синтеза ДНК на матрице в… … Генетика. Энциклопедический словарь
Секвенирование линейной амплифицированной ДНК — * секвеніраванне лінейнай ампліфікаванай ДНК * linear amplification DNA sequencing техника секвенирования нативной двунитчатой ДНК после ее амплификации методом ПЦР. Очищенную ДНК и меченый по 51 концу секвенирующий прймер смешивают с четырьмя… … Генетика. Энциклопедический словарь
Секвенирование прямым подходом — * секвеніраванне прамым падыходам * sequencing by direct approach метод определения последовательности оснований в самой РНК, для чего сначала метят 51или 31 конец молекулы РНК с помощью 32РО4. Затем меченую цепь расщепляют с помощью ферментов,… … Генетика. Энциклопедический словарь
Вертикальное секвенирование — * вертыкальнае секвеніраванне * vertical sequencing один из методов секвенирования ДНК, при котором комбинируют секвенирование по Сэнгеру (см.) с масс спектрометрией … Генетика. Энциклопедический словарь
Линейной амплифицированной ДНК секвенирование л с при ПЦР [полимеразной цепной реакции] — Линейной амплифицированной ДНК секвенирование, л. с. при ПЦР [полимеразной цепной реакции] * лінейнай ампліфікаванай ДНК секвеніраванне, л. с. пры ПЛР [полімеразнай ланцуговай рэакцыі] * linear amplification DNA sequencing or linear polymerase… … Генетика. Энциклопедический словарь
Кленова фрагмент — * Клёнава фрагмент * Klenow fragment полипептид размером 75 кДа, обладающий 51 → 31 полимеразной и 31 → 51 экзонуклеазной активностью, но не обладающий 51 31 экзонуклеазной активностью. Функционирование полимеразы и 31 51 активности происходит на … Генетика. Энциклопедический словарь
pEMBL-векторы — * pEMBL вектары * pEMBL семейство однонитчатых (4 кб) плазмидных векторов клонирования (см.), полученных на основе плазмиды pUC и содержащих ген bla (ампициллинустойчивости) в качестве селективного маркера, короткий сегмент ДНК, кодирующий α… … Генетика. Энциклопедический словарь
Метод обрыва цепи метод Сэнгера — Метод обрыва цепи, метод Сэнгера * метад абрыву ланцуга, м. Сэнгера * chain termination method or ch. t. v. of Sanger метод, используемый для определения нуклеотидной последовательности ДНК () … Генетика. Энциклопедический словарь
