Протеиназа К

[[Изображение:|px|Протеиназа K chemical structure]]
протеиназа К
Обозначения
Symbol(s)	[1]
Entrez	[2]
OMIM	[3]
RefSeq	[4]
UniProt	P06873
PDB	[5]
Другие данные
Шифр КФ	3.4.21.64
Локус	Хр. [6]

Протеиназа K (протеаза K, эндопептидаза K; КФ 3.4.21.64) — сериновая протеаза широкого спектра. Обнаружена в 1974 году в экстракте грибка Engyodontium album. Протеиназа К способна расщеплять кератин, основной белок волос, отсюда и пошло её название. Основные участки в пептиде, распознаваемые и гидролизуемые протеиназой, — пептидные связи, соседствующие с карбоксильной группой алифатических и ароматических аминокислот с закрытой альфа-амино-группой. Широко используется благодаря её широкой специфичности.

Структура

Протеиназа К состоит из 279 аминокислот. Для ферментативной активности требует ионов Ca²⁺. Молекула белка связывает 2 иона кальция.

Применение в биологии

В молекулярной биологии протеиназа К широко применяется для удаления белковой примеси в препаратах нуклеиновых кислот. Кроме этого, протеиназа К быстро расщепляет и инактивирует нуклеазы в препаратах ДНК или РНК. Протеиназа К устойчива ко многим денатурирующим агентам, таким как додецил-сульфат натрия и мочевина, хелатирующим агентам (ЭДТА) и сульфгидрильным реагентам, а также к ингибиторам трипсина и химотрипсина. Протеиназа К работает в широком диапазоне pH (4-12), её оптимум - pH 7,5-12. Всё это делает её чрезвычаино удобной в применении. Более этого, денатурирующие агенты повышают доступность пептидных связей белков для протеиназы К и, таким образом, даже ускоряют их гидролиз.