- полимеразная цепная реакция
-
- Термин
- полимеразная цепная реакция
- Термин на английском
- polymerase chain reaction
- Синонимы
- Аббревиатуры
- ПЦР, PCR
- Связанные термины
- ДНК, РНК, олигонуклеотид, плазмида
- Определение
- Полимеразная цепная реакция - экспериментальный метод молекулярной биологии, позволяющий получать значительное увеличение количества специфических фрагментов ДНК.
- Описание
- В основе метода ПЦР лежит многократное копирование (амплификация) специфического фрагмента ДНК-мишени. Такое копирование осуществляется ферментом термостабильной ДНК-полимеразой в присутствии дезоксирибонуклеозидтрифосфатов (дНТФ) и синтетических олигонуклеотидных (20-25 нп) праймеров - затравок синтеза ДНК. Праймеры комплементарны участкам, фланкирующим последовательность-мишень на противоположных цепях ДНК. После отжига (присоединения) праймеров на противоположных цепях ДНК их 3’-концы направлены навстречу друг другу. Поскольку синтез новых комплементарных цепей ДНК инициируется 3’-гидроксильной группой праймера, то синтез копий фрагмента ДНК происходит в границах последовательности, фланкируемой праймерами. В результате происходит экспоненциальное увеличение числа копий специфического фрагмента по формуле 2n, где n - число циклов амплификации. Существует множество специализированных разновидностей ПЦР (Reverse Transcription PCR, Asymmetric PCR, Nested PCR, Inverse PCR, Touchdown PCR и др.), предназначенных для решения специальных задач, а также количественные варианты ПЦР, из которых в настоящее время широко используется ПЦР в реальном времени (Quantitative Real time PCR). Метод ПЦР в реальном времени основан на детекции флуоресценции продуктов амплификации за счет введения в реакционную смесь флуоресцирующих компонентов (флуоресцентно-меченых зондов или праймеров или собственно флуоресцентных красителей, интеркалярно встраивающихся в двухцепочечную ДНК). В нанобиотехнологии ПЦР широко используется для получения больших количеств специфических последовательностей ДНК для различного применения (создание зондов, векторов, чипов, молекул ДНК заданной геометрической формы и др).
- Авторы
- Народицкий Борис Савельевич, д.б.н.
- Нестеренко Людмила Николаевна, к.б.н.
- Борисенко Григорий Геннадиевич, к.б.н.
- Ссылки
- Глик Б., Пастернак Дж. Молекулярная биотехнология принципы и применение. Пер. с англ. - М.: Мир, 2002 - 589 с.
- Нанотехнологии. Наноматериалы. Наносистемная техника. Мировые достижения. - 2008 год: Англо-русский терминологический словарь по микро-наносистемной технике./ Сборник под ред. д.т.н., профессора П.П. Мальцева. - Москва:Техносфера,2008.-432 с.
- Анализ генома. Методы / Под ред. К. Дейвиса. М.: Мир, 1990. 246 с.
- Иллюстрации
Схема механизма полимеразной цепной реакции
Источник: Анализ генома . Методы . М .:Мир , 1990, с.173- Теги
- Разделы
- Наномедицина и диагностика
Биологические методы, основанные на амплификации
(Источник: «Словарь основных нанотехнологических терминов РОСНАНО») - Термин
Энциклопедический словарь нанотехнологий. — Роснано. 2010.