культура ткани

культу́ра тка́ни

(эксплантация), длительное сохранение и выращивание в специальных питательных средах клеток, тканей, небольших органов или их частей, выделенных из организма человека, животных или растений. Применяется в биологии для изучения тканей, онтогенеза; лежит в основе клеточной инженерии — одного из важнейших методов современной биотехнологии.

* * *

КУЛЬТУРА ТКАНИ

КУЛЬТУ́РА ТКА́НИ (эксплантация), метод длительного сохранения и выращивания в специальных питательных средах клеток, тканей, небольших органов или их частей, выделенных из организма человека, животных и растений. Основан на методах выращивания культуры микроорганизмов (см. КУЛЬТУРА МИКРООРГАНИЗМОВ), обеспечивающих асептику (см. АСЕПТИКА), питание, газообмен и удаление продуктов обмена культивируемых объектов. Одно из преимуществ метода тканевых культур — возможность наблюдения за жизнедеятельностью клеток с помощью микроскопа.
Животные ткани
Первые опыты по культуре животных тканей были проведены немецким биологом В. Ру (см. РУ Вильгельм), которому удалось в 1885 в течение нескольких дней поддерживать развитие нервной пластинки (зачатка центральной нервной системы) куриного эмбриона в теплом солевом растворе. Однако лишь предложенная американским биологом Р. Гаррисоном в 1907 воспроизводимая техника послужила основой для развития этого метода. Культивируя в сгустках лимфы небольшие кусочки нервной трубки эмбриона лягушки, он через несколько недель наблюдал образование нервных волокон. Французский хирург и патофизиолог А. Каррель (см. КАРРЕЛЬ Алексис), сумевший в течение 34 лет сохранять у штамма (см. ШТАММ) клеток сердца куриного эмбриона способность к активным делениям, доказал таким образом, что животные клетки могут неограниченно долго расти в культуре in vitro (то есть в пробирке, в искусственных условиях).
Животные клетки выращивают in vitro либо прикрепленными к подходящей подложке, либо суспендированными в жидких питательных средах (см. ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ). Для масштабного выращивания клеток используют реакторы для промышленного культивирования микроорганизмов. Различают 3 типа культуры клеток: первичные культуры, получаемые практически из любого органа и существующие лишь до первого пересева; диплоидные культуры (см. диплоид (см. ДИПЛОИД)), чаще получаемые из эмбриональных тканей и сохраняющие до 50 пересевов диплоидный набор хромосом, которые затем трансформируются в постоянные (перевиваемые) гетероплоидные культуры, существующие вне организма десятки лет. В отличие от культуры клеток, задачей культуры органов, осуществляемой с применением жидких или твердых сред в стеклянных капиллярах, на покровных стеклах и нитроцеллюлозных фильтрах, на агаре (см. АГАР) и т. п., является сохранение нормальной структуры тканей и нормального их развития.
Культуру животных тканей применяют для изучения механизмов роста и дифференцировки (см. ДИФФЕРЕНЦИРОВКА)клеток, гистогенеза (см. ГИСТОГЕНЕЗ), межтканевых и межклеточных взаимодействий, обмена веществ и т. п. Культуры животных клеток являются важными продуцентами (см. ПРОДУЦЕНТЫ)многих клеточных продуктов, например, противовирусного агента интерферона (см. ИНТЕРФЕРОН). На них выращивают вирусы для их идентификации и получения вакцин (см. ВАКЦИНА). Клеточные культуры часто применяют при тестировании и изучении механизма действия лекарственных и косметических средств, пестицидов (см. ПЕСТИЦИДЫ), консервантов и т. п. Методы культуры клеток нашли широкое применение для реконструкции различных тканей и органов. Так, культура клеток кожи используется для заместительной терапии при ожогах, культура клеток эндотелия (см. ЭНДОТЕЛИЙ)— для реконструкции стенок сосудов. Способность клеток к росту в культуре привела к развитию методов клонирования (см. клон (см. КЛОН)), хранения и слияния клеток (см. клеточная инженерия (см. КЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕНЕРИЯ)), что, в свою очередь, вызвало становление новой области науки — генетики соматических клеток (см. сома (см. СОМА (клетки животного или растения))). Органные культуры используются при изучении закономерностей развития органов, для изучения способов сохранения жизнеспособности изолированных органов, предназначенных для трансплантации.
Растительные ткани
Идея о возможности культивирования растительных клеток была высказана еще в конце 19 — начале 20 вв. немецкими учеными Х. Фехтингом (1892), С. Рехингером (1893) и Г. Габерландтом (см. ГАБЕРЛАНДТ)(1902). Однако лишь в 1922 американскому исследователю В. Роббинсу удалось в течение нескольких недель культивировать корневые меристемы (см. МЕРИСТЕМА)томатов. Начало же успешному развитию метода культуры клеток и тканей растений положили работы Р. Готре (Франция) и Ф. Уайта (США), показавших в 30-е годы способность каллюсных культур (см. каллюс (см. КАЛЛЮС)) к неограниченному росту. Американский ученый Ф. Стюард, работая с культурой изолированной флоэмы (см. ФЛОЭМА)моркови, получил из нее в 1958 целые растения. Значительный вклад в развитие культуры клеток и тканей растений в нашей стране внесли исследования Р. Г. Бутенко (см. БУТЕНКО Раиса Георгиевна) и ее сотрудников, использовавших эти методы для изучения физиологии растительных клеток и морфогенеза растений.
Культивирование растительных клеток и тканей in vitro проводят на агаризованных либо жидких питательных средах, содержащих в качестве одного из основных компонентов фитогормоны (см. ФИТОГОРМОНЫ). Разработаны способы выращивания отдельных клеток. Изменяя условия культивирования, прежде всего концентрацию и соотношение различных гормонов, можно либо длительно поддерживать неорганизованный рост каллюсной ткани, либо индуцировать в ней образование различных органов. Клетка из практически любой ткани растения, в отличие от животной клетки, способна в условиях in vitro к делению и дифференцировке (см. ДИФФЕРЕНЦИРОВКА)с последующим формированием целого растения (см. тотипотентность (см. ТОТИПОТЕНТНОСТЬ)). Важным этапом в развитии методов культуры клеток растений явилась разработка в 1960 профессором Ноттингемского университета Э. Коккингом (Великобритания) метода ферментативного изолирования протопластов (см. ПРОТОПЛАСТ), которые оказались способными в асептической культуре к регенерации в целое растение. Изолированные протопласты, по выражению американского исследователя А. Галстона, вывели растительную клетку из «деревянной тюрьмы» и открыли перспективы различных манипуляций с ней — клеточной инженерии (см. КЛЕТОЧНАЯ ИНЖЕНЕРИЯ).
Культура клеток, тканей и органов растений используется для выращивания клеточной биомассы растений, прежде всего лекарственных, с целью получения из нее ценных соединений, в генетико-селекционной работе, а также для изучения фундаментальных проблем физиологии и генетики растений, фитопатологии (см. ФИТОПАТОЛОГИЯ), онтогенеза (см. ОНТОГЕНЕЗ) растений и др. Для сохранения генофонда растений созданы банки меристемных тканей, хранящихся в условиях криоконсервации.