Заражение экспериментальное

Заражение экспериментальное

искусственное введение животным лабораторным (см.) иссл. к-ры микроорганизмов, токсинов, иссл. материала, в к-ром предполагается содержание микробов или их токсинов. В микробиологии З. э. применяют с целью воспроизвести заболевание или его признаки при постановке этиол. д-за или идентификации выделенной к-ры, определить вирулентность, токсичность, токсигенность иссл. к-ры, для контроля иммуногенности, безвредности, токсичности, стерильности и пирогенности бакпрепаратов. Первый этап 3. э. состоит в выборе лабораторного животного, к-рый основывается на знании чувствительности отдельных видов животных к микроорганизмам. Кролики чувствительны к стафилококкам, стрептококкам, пневмококкам, некоторым видам сальмонелл, возбудителям туберкулеза, сибирской язвы, пастереллеза, листериоза, столбняка, анаэробной газовой инфекции, ботулизма, сифилиса, бешенства, герпеса простого, амебиаза, токсоплазмоза; морские свинки - к возбудителям туберкулеза, дифтерии, сапа, чумы, бруцеллеза, лептоспироза, туляремии, листериоза, мелиоидоза, столбняка, анаэробной газовой инфекции, ботулизма, сыпного тифа, ящура, орнитоза; белые мыши - к пневмококкам, клебсиеллам пневмонии и озены, некоторым видам сальмонелл, возбудителям сибирской язвы, листериоза, пастереллеза, туляремии, мелиоидоза, ботулизма, столбняка, анаэробной газовой инфекции, лепры, клещевого спирохетоза, коклюша, сыпного тифа, орнитоза, бешенства, арбовирусам, вирусам Коксаки (новорожденные), лейшманиям, токсоплазмам. Крыс белых применяют для воспроизведения мелиоидоза, бешенства, содоку, амебиаза, токсоплазмоза; хомяков сирийских - бруцеллеза, сапа, бешенства, полиомиелита, геморрагических лихорадок, лейшманиоза, токсоплазмоза, амебиаза, лептоспирозов, риккетсиозов, полиомиелита. В опыт берут здоровых и стандартизированных по породе, линии, массе, возрасту, полу, упитанности животных. На хорошее состояние здоровья животного указывают гладкая и блестящая шерсть, чистые глаза, отсутствие выделений из носа, глаз, рта, половой щели, чистое заднепроходное отверстие, хороший аппетит, нормальная реакция на стук и др. раздражители. К-ру для заражения стандартизируют по плотности, возрасту, суспендирующей жидкости. Материал должен быть забран в асептических условиях, в стерильную посуду, гомогенизирован, использован для 3. э. возможно быстрее. Способ заражения зависит от типа материала, вида животного, предполагаемого повреждающего агента. Материал может быть введен накожно, подкожно, внутрикожно, в/м, внутрибрюшинно, в/в, через нос, рот и прямую кишку, в сердце, желудок, мозг, в ватину, яичко, конъюнктиву, в суставные полости. Перед заражением с операционного поля необходимо удалить шерсть и обработать его 70% этанолом с последующим смазыванием настойкой йода. При болезненных вмешательствах проводят предварительное обезболивание: мелких животных помещают до засыпания в закрытый стеклянный сосуд, в к-ром находится вата, смоченная эфиром или хлороформом; кроликов усыпляют с помощью специальной маски или надетого на нос бумажного конуса, в узком конце к-рого находится смоченная эфиром или хлороформом вата. Во время заражения животное должно быть надежно фиксировано. Мыши фиксируются левой рукой за кожную складку затылка (или шеи) и за хвост (иногда за хвост и заднюю лапку); крысы - корнцангом; морских свинок и кроликов пеленают в халат, полотенце или помещают в специальный станок. Материал вводят стерильным шприцем с соблюдением правил асептики. По мере заражения животных маркируют: мышей - окраской пикриновой к-той или спиртовым р-ром фуксина, надрезом края уха, обрезанием коготков; более крупных животных - нумерованными бляшками или кольцами. Морских свинок можно маркировать зарисовкой окраски, к-рая у них редко повторяется. В период наблюдения животные должны быть обеспечены полноценным питанием, доброкачественной питьевой водой, предохранены от простуды, перезаражения. Методика наблюдения зависит от ожидаемого эффекта. При определении вирулентности, токсигенности, токсичности через определенный срок учитывают гибель животных или появление инфильтратов. При этиол. д-ке наблюдают за возникновением признаков заболевания (желтуха, кровоизлияния, параличи, повышение температуры, изменение поведения, потеря массы тела и др.), берут для бактериол. и серол. исследования кровь или др. материал (мочу, кал, др. выделения). Кровь забирают с соблюдением правил асептики у кроликов из краевой вены уха или из сердца; у морских свинок -из сердца; у мышей- из венозного синуса внутреннего угла глаза и из вен хвоста. Мочу и кал забирают у мышей, помещая их в большую стеклянную воронку с перфорированной пластинкой, у морских свинок и кроликов - содержа их в клетках с двойным дном и стоком. Из конъюнктивы, носа, вагины, ран материал забирают бактер. петлей, из бубонов и инфильтратов - шприцем. Материал засевают на питательные среды для выделения чистой к-ры; кровь, кроме того, исследуют на содержание Ат. В случае гибели животного или его умерщвления проводят микробиол. исследование трупа. Трупы вскрывают как можно скорее после гибели (умерщвления) животного в асептических условиях: мелких животных - в кюветах на парафиновой пластинке, крупных - на специальных операционных столиках. Трупы кладут на спину, лапы растягивают и фиксируют, шерсть передней половины туловища обрабатывают дезинфектантом (следует предупредить попадание дезинфектанта в пробы материала и на питательные среды!), делают ножницами продольный разрез от подбородка до лобка и четыре поперечных разреза к лапкам. Кожу отсепаровывают скальпелем. Дальнейший ход вскрытия зависит от задач исследования. Осуществляют или полное протокольное вскрытие с изготовлением мазков-отпечатков и посевами на питательные среды проб из лимфатических узлов (паховых, аксиллярных, шейных, мезентериальных) и внутренних органов (легких, сердца, мозга, печени, селезенки, почек) или только из тех органов, в к-рых локализуется патологический процесс (напр., из легких). Для посева вырезают небольшие кусочки органов через прижженную скальпелем поверхность, затем делают последовательно посев-отпечаток и мазок-отпечаток. Засеять на среду можно также соскоб скальпелем или петлей. Кровь забирают из сердца пастеровской пипеткой или шприцем. При вскрытии в целях выделения к-ры микробов следует пользоваться стерильным инструментарием, меняя его в процессе вскрытия или прокаливая его смоченным в спирту на огне, что менее желательно. Последовательность вскрытия: череп, грудная и брюшная полости. Для вскрытия грудной полости делают разрезы по хрящам вдоль грудной кости, откидывают вверх грудную кость, что дает доступ к легким и сердцу. При вскрытии черепа скальпируют кожу черепа, обрабатывают дезинфектантом, ножницами срезают верхнюю половину черепной коробки и откидывают ее назад. Для вскрытия брюшной полости пинцетом приподнимают вверх брюшную стенку, осторожно, чтобы не повредить кишечник, делают продольный и поперечный разрезы передней стенки живота ножницами. Труп после вскрытия сжигают, инструменты дезинфицируют, очищают, стерилизуют, остальные предметы дезинфицируют, очищают. См. также Виварий, Животные лабораторные, Экспериментальный метод.

(Источник: «Словарь терминов микробиологии»)